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1、天津醫(yī)科大學博士學位論文衣原體噬菌體phiCPG1衣殼蛋白Vp1單克隆抗體的制備及初步應用姓名:侯淑萍申請學位級別:博士專業(yè):病原生物學指導教師:劉全忠20090501天津醫(yī)科大學博士學位論文經(jīng)三次基礎免疫后小鼠血清中的抗體效價可達到1:6400。融合后一周左右,雜交瘤細胞可生長至1/3~1/2孔,取上清液測抗體分泌情況,篩選出3個陽性孔。將陽性孔擴大培養(yǎng)后進行三次亞克隆化,獲得單克隆,擴大培養(yǎng)后進行雜交瘤細胞及單克隆抗體的鑒定。雜交瘤
2、細胞染色體分析發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目平均為98。結構上多數(shù)為端著絲點染色體,還有少數(shù)亞中部著絲點染色體。3株細胞分泌的單克隆抗體的免疫球蛋白類別均為IgGl。動物體內誘生的腹水中抗體經(jīng)純化后效價大于1:102400。利用得到的單克隆抗體檢測了20份臨床標本,結果均為陰性。綜上所述,本研究成功獲得了衣原體噬菌體PhiCPGl的衣殼蛋白Vpl的純品,制備了抗衣原體噬菌體衣殼蛋白Vpl的單克隆抗體,采用免疫熒光法將其用于臨床沙眼衣原體噬菌體的篩查,尚
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