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1、中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院碩士學(xué)位論文小鼠核移植胚胎干細胞系的建立及其全能性檢測姓名:張曉進申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):@指導(dǎo)教師:高紹榮郭巖20040901中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)北京生命科學(xué)研究所DerivationandpluripotencyanalysbofEScellsfrompreimplantationembryosproducedbysomaticcellnucleartransfer(sCNT)Abstract
2、Embryonicstem(ES)cellsarederivedfromtheinnercellmassofblastocystsproducedinvivoorbyinvitrofertilizationEScellsarepluripotentandcandifferentiateintoallthecelltypesofthreegermlayersRecentlyEScellshavebeenmcceesfullyderived
3、fromembryosproducedbysomaticcellnucleartransfer(SCNT)andithasbeenproposedimportantfortherapeuticpurposeandbasicresearchm‘thefutureInthepresentstudywederivedpluripotentembryonicstem(ES)cellsfrommurineblastocystsproducedby
4、somaticceilnucleartransfer(scNl3ThepluripotecyanddifferentiationpotentialofthentEScellsareinvestigatedbyRTPCRimmunocytochcmistrystainingandchimeraproductionWehavegeneratedmore70ntEScelllinesfromdifferentstrainofmicewhich
5、include1290G2F1andBDFImicethroughSCNTInthestudywefoundtheefficiencytosuccessfullyderiventEScellslinesfromclonedembryosvariedwithdifferentgeneticbackgroundofdonorcellsusedinSCNTTheBDFlmoⅡ卵ntESderivationefficiencyWas1062%o
6、G2(B6xCBA)n啦Swas10∞%,1290G2F1(129xB6xCBA)ntESWas3732%,B60G2F1(B6xB6xCBA)ⅡtESWas1016%andZEG(ICR)Wnsonly1%Obvious馱comparedtoothermousestrains,1290G2FIgeneticbackgroundhasexhibitedadvantagesinntEScellderivationThesentEScell
7、sappearedtomaintainnormalESappearanceinvitroSixⅡtEScelllinesfrom1290G2FlmotileandsixBDFlntEScellslineswerechosentoinvestigatethepluripotencyOur髑uItsindicatedfiveofthetwelventEScelllinestestedexhibitedsimilarpluripotencyc
8、omparedtonormalEScellsThegenesencodedtranscriptionfactorswhichareessentialformaintainingEScellspluripotencyincludingOct4,Sox2,NanogandRexI,wereexpressedintheⅡ倔ScellsastestedbyRTPCRandimmunocytoehemistrystainiⅡ昏Thediffere
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